2021-923
GSTPulldown實驗技術1.實驗原理Pulldown技術是將"誘餌"蛋白與一種易于純化的配體標簽（如：GST標簽、His標簽）進行融合表達，而帶標簽的誘餌蛋白能被特異結合該標簽的固相親和配基捕獲，形成"次級親和支持物"，用于純化與誘餌蛋白相互作用的其他蛋白。純化產物洗脫后，經Westernblot驗證或LC-MS/MS，即鑒定與誘餌蛋白互作的蛋白。1988年Smith等利用谷胱甘肽-S-轉移酶（GST）融合標簽從細菌中一步純化出GST融合蛋白。從此，GST融合蛋白在蛋白...
查看更多2021-922
細胞凋亡人體內的細胞注定是要死亡的，有些死亡是生理性的，有些死亡則是病理性的，有關細胞死亡過程的研究，已成為生物學、醫學研究的一個熱點。已知的細胞死亡方式起碼有兩種，即細胞壞死與細胞凋亡(apoptosis)。細胞壞死是早已被認識到的一種細胞死亡方式，而細胞凋亡則是逐漸被認識的一種細胞死亡方式。此圖片來源于網絡細胞凋亡是細胞的一種基本生物學現象，在多細胞生物去除不需要的或異常的細胞中起著必要的作用。它在生物體的進化、內環境的穩定以及多個系統的發育中起著重要的作用。細胞凋亡不僅...
查看更多2021-917
中樞性性早熟（CPP）是兒科內分泌的常見疾病，發病率較高，且逐年增加趨勢明顯。CPP可以導致患者或者家長出現社會、心理問題，而且還可能嚴重損害兒童的終身高。因此，CPP是兒科內分泌醫生密切關注的疾病之一。CPP發病原因目前尚不明確，可能是由于某種因素促發了下丘腦促性腺激素釋放激素（GnRH）神經元，使其提前活化，通過分泌大量的GnRH，進而激活下丘腦-垂體-性腺軸。5-羥色胺（5-HT）最初在血清中發現，又名血清素，是一種吲哚衍生物，它廣泛存在于哺乳動物中。5-HT由色氨酸代...
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2021-917
人的生存離不開氧氣。如果你感覺很長一段時間里整天無精打采、昏昏欲睡，在排除睡眠不足的因素外，那么你有可能是血液中缺氧了。血液除了能在身體內流動，攜帶能量、廢物等，最主要的功能就是攜帶氧氣，這是它的基本功能之一。如果血液缺氧，嚴重時就會導致器官病變，最常見的就是心梗、腦梗等。近年來，低氧(Hypoxic)于生物機體及細胞的生理作用及其分子機制研究越來越受到醫學科研學者的關注。低氧培養的適用研究領域近30年來與“低氧誘導”相關的文章統計(此項數據來源于Pubmed數據庫)細胞是生...
查看更多2021-916
細胞焦亡是什么？細胞凋亡（Apoptosis）是經典的細胞死亡方式，但隨著研究的不斷深入，很多細胞死亡現象并不能用細胞凋亡來解釋，隨著研究的深入，科學家又陸續發現了一些新的細胞死亡新機制。細胞焦亡（Pyroptosis）便是近年來發現并證實的一種炎癥程序性細胞死亡，其特征為依賴于炎性半胱天冬酶（主要是caspase-1，4，5，11），并伴有大量促炎癥因子的釋放。細胞焦亡可由各種病理刺激引發，如中風、心臟病發作、癌癥、感染等。按照激活機制，細胞焦亡可分為Caspase-1依賴...
查看更多2021-916
如何選擇合適的內參抗體？Tips：在選擇內參抗體時，我們需要遵循幾個原則：1.種屬來源哺乳動物的樣本需要選擇哺乳動物中穩定表達的蛋白作為內參，同樣的，植物樣本需要選擇植物中穩定表達的蛋白作為內參。2.細胞定位靶標蛋白的細胞定位不同，適合的內參也不同。如全細胞裂解液可選擇beta-actin、beta-tubulin等，膜蛋白一般選擇NaKATPase，核蛋白則選擇LaminB1、HistoneH3等。3.分子量內參蛋白的分子量需要與目標蛋白的分子量有所區別，否則兩者條帶無法分...
查看更多2021-915
TUNEL法基于對細胞DNA損傷的檢測，通常可用于檢測組織切片樣本和細胞樣本，是晚期細胞凋亡檢測中常用的方法。那么對于檢測過程中常見的假陽性率高的現象是如何產生的呢？1.固定操作不當固定液選擇不恰當，固定液濃度過高，固定時間過長，組織切片過厚都會影響固定效果。一般建議選擇含4%多聚甲醛的PBS溶液來固定細胞或組織切片，時間在30min左右。2.基因轉錄水平高基因轉錄活性高的非凋亡細胞會產生假陽性，例如睪丸組織。3.激發光下長時間照射在強激發光長時間照射下，高濃度的PI會吸收能...
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